Связь полиморфизма генов AGT, ACE, NOS3 с субклиническими изменениями артериальной стенки и факторами риска сердечно-cосудистых заболеваний

Обложка


Цитировать

Полный текст

Аннотация

Актуальность. Активация ренин-ангиотензин-альдостероновой системы и снижение продукции оксида азота (NO) приводят к изменениям артериальной стенки, которые создают метаболически и ферментативно благоприятную среду для развития сердечно-сосудистых заболеваний (ССЗ). Влияние полиморфизма генов, кодирующих белки, которые участвуют в активации ренин-ангиотензин-альдостероновой системы и обеспечении биодоступности NO, на параметры состояния артериальной стенки (скорость пульсовой волны, толщину комплекса интима-медиа, эндотелийзависимую вазодилатацию, наличие атеросклеротических бляшек) и факторы риска ССЗ изучено недостаточно.

Цель — изучение связи полиморфизма генов AGT, ACE, NOS3 с параметрами артериальной стенки: скоростью пульсовой волны, толщиной комплекса интима-медиа, эндотелийзависимой вазодилатацией, наличием атеросклеротических бляшек и факторами риска ССЗ у относительно здоровых людей.

Методы. С помощью межгруппового анализа и построения моделей множественной логистической регрессии мы изучили связь полиморфизма с.521С>Т гена AGT, Ins>Del гена AСE, с.894G>T гена NOS3 с параметрами изменения артериальной стенки и факторами риска ССЗ у 160 относительно здоровых человек разного возраста.

Результаты. Выявлена связь генотипа CT полиморфизма с.521С>Т гена AGT с более низкими значениями систолического артериального давления (САД) (p=0,013) и центрального САД (p=0,029), более высоким уровнем инсулиноподобного фактора роста (ИПФР-1) (p=0,027). Выявлена связь генотипа DD полиморфизма Ins>Del гена ACE с более высоким отношением объема талии к объему бедер (p=0,044), меньшим уровнем липопротеидов высокой плотности (p=0,01), меньшими показателями эндотелийзависимой вазодилатации (p=0,042), чаще встречающейся эндотелиальной дисфункцией (p=0,026). Отмечалась связь генотипа GG полиморфизма с.894G>T гена NOS3 с более высокими уровнями центрального САД (p=0,022) и центрального среднего АД (p=0,033), общего холестерина (p=0,025) и холестерина липопротеидов низкой плотности (p=0,014), ИПФР-1 (p=0,042), большей частотой эндотелиальной дисфункции (p=0,007), альбуминурии (p =0,032) и инсулинорезистентности (p=0,03).

Заключение. Выявлена взаимосвязь полиморфных вариантов генов AСE, NOS3 с эндотелиальной дисфункцией, метаболическим статусом.

Полный текст

ВВЕДЕНИЕ

Сердечно-сосудистые заболевания (ССЗ) являются ведущей причиной заболеваемости и смертности во всем мире, в том числе и в Российской Федерации [1]. Важными факторами риска ССЗ являются субклинические изменения артериальной стенки, к которым относятся повышение артериальной жесткости, утолщение комплекса интима-медиа, появление атеросклеротических бляшек, эндотелиальная дисфункция [2]. Изменения артериальной стенки создают метаболически и ферментативно благоприятную среду для развития ССЗ. Так, повышение скорости пульсовой волны на 1 м/с увеличивает риск сердечно-сосудистой смертности на 15% [3]. Связь субклинических изменений артериальной стенки с факторами риска CCЗ, в первую очередь с артериальной гипертензией (АГ), параметрами углеводного и липидного обмена, маркерами воспаления, изучена достаточно хорошо [4]. При этом ассоциация состояния артериальной стенки с генетическими особенностями изучена недостаточно. Известно, что ведущую роль в развитии изменений артериальной стенки играет активация ренин-ангиотензин-альдостероновой системы, снижение активности NO-синтазы (NOS), ведущее к снижению биодоступности оксида азота (NO). Активация ренин-ангиотензин-альдостероновой системы происходит вследствие повышения уровня ангиотензина II. Ангиотензин II образуется в ходе цепи реакций из ангиотензиногена при участии ангиотензинпревращающего фермента. Связь полиморфизма генов ангиотензиногена (AGT), ангиотензинпревращающего фермента (AСE), NO-синтазы 3-го типа (NOS3) с ССЗ, такими как ишемическая болезнь сердца, АГ, ишемический инсульт, доказана в ряде клинических работ [5–8].

Целью нашей работы было изучение связи полиморфизма генов AGT, ACE, NOS3 с параметрами артериальной стенки: скоростью пульсовой волны, толщиной комплекса интима-медиа (ТКИМ), эндотелийзависимой вазодилатацией (ЭЗВД), наличием атеросклеротических бляшек и факторами риска ССЗ у относительно здоровых людей.

МЕТОДЫ

Характеристика пациентов

В исследование были включены 160 человек (55 мужчин и 105 женщин) в возрасте от 25 до 82 лет, обратившихся в МНОЦ МГУ имени М.В. Ломоносова для профилактического осмотра в 2018–2019 гг.

Критерии соответствия

Критериями исключения были любые известные хронические неинфекционные заболевания, в том числе ССЗ, АГ 3-й степени, онкологические заболевания, а также регулярный прием антигипертензивных, гиполипидемических, сахароснижающих и любых других препаратов, беременность, период лактации, отказ от участия в исследовании.

Всеми пациентами было подписано информированное согласие на участие в исследовании. Протокол исследования был одобрен локальным Этическим комитетом МНОЦ МГУ.

Описание медицинского вмешательства

У всех пациентов измерялись антропометрические показатели: окружность талии и окружность бедер, их соотношение, вес, рост.

Уровень систолического (САД) и диастолического (ДАД) артериального давления измерялся на калиброванном приборе с использованием плечевой манжеты (HEM-7200 M3, Omron Healthcare, Kyoto, Япония). АГ диагностировали при значении САД ≥140 мм рт.ст. и/или ДАД ≥90 мм рт.ст.

Определение скорости пульсовой волны и параметров центрального АД (центральное САД, центральное ДАД, центральное пульсовое АД, центральное среднее АД) осуществлялось с использованием метода аппланационной тонометрии прибором SphygmoCor 9.0 hardware (AtCor, Сидней, Австралия). Повышенной скоростью пульсовой волны считалось значение >10 м/с. Ультразвуковое исследование каротидных артерий проводили с использованием системы PHILIPS EPIQ 5 (Нидерланды). Атеросклеротические бляшки определяли как фокальное утолщение стенки сосуда более чем на 50% по сравнению с окружающими участками стенки сосуда или как фокальное утолщение комплекса интима-медиа более чем на 1,5 мм, выступающее в просвет сосуда. Значение ТКИМ ≥0,9 мм считалось повышенным. ЭЗВД определяли с помощью пробы с реактивной гиперемией с использованием системы PHILIPS EPIQ 5 (Нидерланды). Эндотелиальной дисфункцией считалось ЭЗВД <10%.

Определение биохимических параметров крови (общий холестерин, ОХ; холестерин липопротеидов высокой плотности, ХС ЛПВП; триглицериды, ТГ; глюкоза натощак, ГН; креатинин, гликированный гемоглобин, HbА1с) и альбумина мочи (АМ) осуществлялось рутинными методами. Значение липопротеидов низкой плотности (ХС ЛПНП) вычислялось по формуле:

ХС ЛПНП = ОХ - (ТГ / 2,2 + ХС ЛПВП).

Альбуминурией считали АМ >30 мг/л. Сахарный диабет 2-го типа (СД2) диагностировался при значении ГН ≥7,0 ммоль/л или НbA1c ≥6,5%. Определение иммунореактивного инсулина (ИРИ) крови осуществлялось методом хемилюминесценции. Расчет индекса инсулинорезистентности (ИР) HOMA проводился по формуле:

ИР = Концентрация ГН (ммоль/л) ×  ИРИ натощак (мкЕД/л)/22,5.

Индекс инсулинорезистентности диагностировался при HOMA ≥2,5. Инсулиноподобный фактор роста (ИПРФ-1) определялся с помощью твердофазного хемилюминесцентного иммуноферментного анализа. Альдостерон крови определялся иммуноферментным методом.

Определение длины теломер лейкоцитов на геномной ДНК было проведено методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени [9]. Определение аллельных вариантов генов AGT, AСE, NOS3 было проведено методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с использованием наборов компании «ДНК-Технология» (Россия). ДНК была выделена из цельной крови с использованием набора Qiagen DNA blood mini kit (Германия) согласно инструкции.

В данной статье для полиморфизма генов AСE, NOS3 использовалась нуклеотидная запись генотипов, для полиморфизма гена AGT использовалась как нуклеотидная, так и аминокислотная запись генотипов.

Методы статистического анализа

Статистическая обработка результатов проводилась с использованием пакета статистических программ SPSS version 11.0 for Windows (SPSS, Inc., Chicago, IL, США). Для нормально распределенных параметров приведены среднее (M) и стандартное отклонение (SD), а для ненормально распределенных — медиана (Мед), нижний (Нкв) и верхний (Вкв) квартили. Проверка распределений на нормальность проверялась по критерию χ2 Пирсона. При сравнении двух групп с различными генотипами различия оценивались с помощью критерия χ2 Пирсона, при сравнении трех групп с различными генотипами использовался метод дисперсионного анализа и критерий Краскела–Уоллиса. Для оценки влияния исследуемого показателя с учетом вклада остальных влияющих переменных применяли метод построения модели многофакторной логистической регрессии. Логистическая регрессионная модель строилась с принудительным включением основных факторов риска ССЗ и полиморфных вариантов изучаемых генов. Затем методом исключения Вальда строилась урезанная модель с уменьшенным количеством факторов.

В таблицах представлены факторы риска и полиморфизм генов AGT, AСE, NOS3, продемонстрировавшие достоверную связь с изучаемыми параметрами артериальной стенки.

Статистическая значимость выявлялась на уровне p<0,05.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Клиническая характеристика 160 пациентов, включенных в исследование, представлена в табл. 1.

 

Таблица 1. Клиническая характеристика пациентов, включенных в исследование

Показатель

Общая группа (n=160)

Показатель

Общая группа (n=160)

Возраст (лет), M±SD

50,42±13,34

Мужчины (n, %)

55 (34,4)

ОТ/ОБ, M±SD

0,86±0,1

Ожирение (n, %)

41 (25,63)

САД (мм рт.ст.), M±SD

126,26±17,11

ДАД (мм рт.ст.), M±SD

79,28±10,65

Центральное САД (мм рт.ст.) М±SD

116,95±18,11

Центральное ДАД (мм рт.ст.) М±SD

79,86 ±11,32

Центральное пульсовое АД (мм рт.ст.), Meд.(Нкв-Вкв)

34,0 (28,0–42,0)

Центральное среднее АД (мм рт.ст.), М±SD

95,44±13,11

АГ (n, %)

44 (27,5)

ОХ (ммоль/л), M±SD

3,85±1,02

ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD

3,85±1,02

ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD

1,20±0,32

ТГ (ммоль/л), Meд. (Нкв-Вкв)

0,97 (0,71–1,39)

ГН (ммоль/л), Мед. (Нкв-Вкв)

5,30 (4,90–5,80)

НвА1с (%), Meд. (Нкв-Вкв)

5,20 (5,00–5,55)

ИРИ (мкЕД/л), Мед. (Нкв-Вкв)

7,40 (5,60–10,70)

НОМА, Мед. (Нкв-Вкв)

1,80 (1,34–2,57)

ИР (n, %)

44 (28,2)

СД2 (n, %)

21(13,13)

Креатинин (мкмоль/л), М±SD

84,11±15,59

ИПФР-1 (нг/мл), Mед. (Нкв-Вкв)

143,50 (112,00–190,25)

Альдостерон (пг/мл), Mед. (Нкв-Вкв)

72,00 (39,75–117,25)

АМ (мг/л), Мед. (Нкв-Вкв)

8,15 (5,00–14,00)

АУ (n, %)

7 (5,5)

ДТЛ, M±SD

9,82±0,44

СПВ (м/с), M±SD

10,74±2,58

СПВ >10 м/с (n, %)

58,75

ТКИМ (мм), Мед. (Нкв-Вкв)

0,7 (0,58–0,80)

ТКИМ ≥0,9 мм (n, %)

22 (14,8)

АСБ (n, %)

67 (45)

ЭЗВД (%), M±SD

10,76±3,55

ЭД (n, %)

58 (39,7)

Полиморфизм с.521C>T гена AGT, генотипы CC/CT/TT (n, %)

116 (72,5) / 41 (25,63) / 3 (1,88)

Полиморфизм Ins>Del гена ACE, генотипы II/ID/DD (n, %)

47 (29,38) / 69 (43,13) / 44 (27,7)

Полиморфизм c.894G>T гена NOS3, генотипы GG/GТ/ТТ (n, %)

87 (54,38) / 65 (40,63) / 8 (5)

Примечание. Здесь и в табл. 2–4: ОТ/ОБ — окружность талии/бедер, САД/ДАД — систолическое/диастолическое артериальное давление, АГ — артериальная гипертензия, ОХ — общий холестерин, ХС ЛПНП/ЛПВП — холестерин липопротеидов низкой/высокой плотности, ТГ — триглицериды, ГН — глюкоза натощак, ИРИ — иммунореактивный инсулин, ИР НОМА — индекс инсулинорезистентности, СД — сахарный диабет, ИПФР-1 — инсулиноподобный фактор роста 1, АМ — альбумин мочи, АУ — альбуминурия, ДТЛ — длина теломер лейкоцитов, СПВ — скорость пульсовой волны, ТКИМ — толщина комплекса интима-медиа, АСБ — атеросклеротическая бляшка, ЭЗВД — эндотелийзависимая вазодилатация, ЭД — эндотелиальная дисфункция.

 

Результаты сравнения групп с полиморфизмами изучаемых генов приведены в табл. 2–4. Крайне малочисленные группы с определенными генотипами были исключены из анализа.

 

Таблица 2. Клиническая характеристика групп с СС- и СТ-генотипами полиморфизма с.521C>T (p.T174M) гена AGT

Показатель

CC (ТТ) (n=116)

CT (ТМ) (n=41)

p

Показатель

CC (ТТ) (n=116)

CT (ТМ) (n=41)

p

Возраст (лет), M±SD

51,18±2,45

48,46±3,84

0,249

Мужчины (n, %)

41 (35,34)

13 (31,71)

0,673

ОТ/ОБ, M±SD

0,86±0,02

0,85±0,03

0,332

Ожирение (n, %)

30 (25,86)

11 (26,83)

0,903

САД (мм рт.ст.), M±SD

127,621±3,225

122,21±4,59

0,013

ДАД (мм рт.ст.), M±SD

79,91±1,96

77,39±3,11

0,337

Центральное САД (мм рт.ст.), М±SD

119,018±3,475

110,947±4,64

0,029

Центральное ДАД (мм рт.ст.), М±SD

80,30±2,13

78,79±3,45

0,102

Центральное пульсовое АД (мм рт.ст.), M±SD

38,72±2,55

32,16±2,58

0,154

Центральное среднее АД (мм рт.ст.), М±SD

96,56±2,46

92,30±3,79

0,463

АГ (n, %)

34 (29,31)

9 (21,95)

0,364

ОХ (ммоль/л), M±SD

5,65±0,21

5,45±0.34

0.318

ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD

3,9±0,19

3,77±0,31

0,592

ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD

1,19±0,06

1,19±0,1

0,896

ТГ (ммоль/л), Meд. (Нкв-Вкв)

0,98 (0,66–1,4)

0,89 (0,76–1,36)

0,983

ГН (ммоль/л), Мед. (Нкв-Вкв)

5,35 (4,9–5,9)

5,3 (5–5,6)

0,237

НвА1с (%), Meд. (Нкв-Вкв)

5,2 (5–5,6)

5,2 (4,9–5,5)

0,496

ИРИ (мкЕД/л), Мед. (Нкв-Вкв)

7,4 (5,6–10,5)

7,6 (5,6–11,95)

0,777

НОМА, Мед. (Нкв-Вкв)

1,83 (1,34–2,56)

1,78 (1,35–2,87)

0,863

ИР (n, %)

32 (28,32)

12 (30)

0,839

СД2 (n, %)

18 (15,52)

3 (7,32)

0,185

Креатинин (мкмоль/л), М±SD

85,03±2,99

82,05±4,03

0,243

ИПФР-1 (нг/мл), Mед. (Нкв-Вкв)

132,5 (108–172)

176,1 (124,5–215,9)

0,027

Альдостерон (пг/мл), М±SD

89,51±13,61

99,66±25,5

0,386

АМ (мг/л), Мед. (Нкв-Вкв)

8,15 (5–16)

8 (4,26–12)

0,282

АУ (n, %)

5 (5,43)

2 (6,06)

0,893

ДТЛ, M±SD

9,79±0,07

9,92±0,18

0,836

СПВ (м/с), M±SD

8,61±0,37

8,60±0,65

0,553

СПВ >10 м/с (n, %)

24 (20,69)

10 (24,39)

0,621

ТКИМ (мм), Мед. (Нкв-Вкв)

0,7 (0,59–0,86)

0,7 (0,55–0,76)

0,242

ТКИМ ≥0,9 мм (n, %)

19 (17,59)

3 (7,69)

0,137

АСБ (n, %)

54 (50)

13 (33,3)

0,073

ЭЗВД (%), M±SD

10,57±0,66

11,0±0,74

0,326

ЭД (n, %)

46 (42,99)

11 (29,73)

0,155

 

Таблица 3. Клиническая характеристика групп с II-, ID- и DD-генотипами полиморфизма Ins>Del гена ACE

Показатель

II (n=47)

ID (n=69)

DD (n=44)

p

Показатель

II (n=47)

ID (n=69)

DD (n=44)

p

Возраст (лет), M±SD

49,72±3,66

49,83±3,21

52,09±4,03

0,623

Мужчин (n, %)

13 (27,66)

23 (33,33)

19 (43,18)

0,115

ОТ/ОБ, M±SD

0,83±0,02

0,86±0,02

0,88±0,03

0,044

Ожирение (n, %)

8 (17,02)

18 (26,08)

15 (34,09)

0,062

САД (мм рт.ст.), M±SD

127,40±5,61

124,99±4,02

127,05±4,26

0,713

ДАД (мм рт.ст.), M±SD

79,28±3,45

78,38±2,35

80,70±2,95

0,529

Центральное САД (мм рт.ст.), М±SD

115,84±6,12

116,99±4,25

118,12±4,74

0,846

Центральное ДАД (мм рт.ст.), М±SD

78,36±3,18

79,85±2,84

81,51±3,33

0,437

Центральное пульсовое АД (мм рт.ст.), M±SD

37,49±4,36

37,13±2,96

36,61±3,49

0,951

Центральное среднее АД (мм рт.ст.), М±SD

94,10±4,12

95,45±3,18

96,89±3,59

0,619

АГ (n, %)

16 (34,04)

14 (20,29)

14 (31,82)

0,070

ОХ (ммоль/л), M±SD

5,54±0,31

5,60±0,29

5,65±0,30

0,890

ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD

3,76±0,29

3,85±0,25

3,94±0,28

0,697

ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD

1,29±0,09

1,20±0,08

1,09±0,08

0,010

ТГ (ммоль/л), M±SD

1,08±0,21

1,21±0,22

1,37±0,25

0,259

ГН (ммоль/л), Мед. (Нкв-Вкв)

5,4 (5,0-5,9)

5,2 (4,8-5,7)

5,4 (5,5-5,75)

0,470

НвА1с (%), Meд. (Нкв-Вкв)

5,1 (4,7–5,5)

5,2 (5,0–5,7)

5,3 (5,1–5,4)

0,115

ИРИ (мкЕД/л), Мед. (Нкв-Вкв)

8,25±1,32

9,27±2,12

10,06±1,55

0,461

НОМА, Мед. (Нкв-Вкв)

2,09±0,37

2,38±0,59

2,57±0,45

0,495

ИР (n, %)

12 (26,09)

17 (25,37)

15 (34,88)

0,252

СД2 (n, %)

5 (10,64)

10 (14,49)

6 (13,64)

0,539

Креатинин (мкмоль/л), М±SD

81,23±4,03

84,10±4,02

87,20±4,34

0,189

ИПФР-1 (нг/мл), М±SD

169,51±25,21

147,48±14,62

150,24±20,85

0,244

Альдостерон (пг/мл), М±SD

94,63±21,20

84,17±15,36

101,19±29,78

0,511

АМ (мг/л), Мед. (Нкв-Вкв)

9 (6–12,5)

7 (5–14,5)

9 (5–16)

0,921

АУ (n, %)

2 (5,13)

2 (3,64)

3 (8,82)

0,293

ДТЛ, M±SD

9,85±0,12

9,86±0,12

9,73±0,09

0,272

СПВ (м/с), M±SD

8,41±0,62

8,55±0,52

8,89±0,55

0,541

СПВ >10 м/с (n, %)

4 (9,09)

9 (14,06)

9 (21,95)

0,092

ТКИМ (мм), M±SD

0,68±0,05

0,71±0,04

0,76±0,06

0,125

ТКИМ ≥0,9 мм (n, %)

4 (9,09)

9 (14,06)

9 (21,95)

0,092

АСБ (n, %)

18 (40,91)

30 (46,88)

19 (46,34)

0,518

ЭЗВД (%), M±SD

11,44±1,34

11,06±0,79

9,61±0,86

0,042

ЭД (n, %)

13 (30,95)

23 (36,51)

22 (53,66)

0,026

 

Таблица 4. Клиническая характеристика групп с GG-, GT- и TT-генотипами полиморфизма c.894G>T гена NOS3

Показатель

GG (n=87)

GТ (n=65)

TT (n=8)

p

Возраст (лет), M±SD

51,87±2,83

48,74±3,20

48,25±9,17

0,32

ОТ/ОБ, M±SD

0,87±0,02

0,85±0,02

0,83±0,04

0,253

САД (мм рт.ст.), M±SD

127,45±3,48

125,27±4,28

121,38±13,81

0,528

ДАД (мм рт.ст.), M±SD

79,83±2,26

78,48±2,47

79,88±9,59

0,734

Центральное САД (мм рт.ст.), М±SD

120,60±3,92

113,24±4,32

108,88±11,02

0,022

Центральное ДАД (мм рт.ст.), М±SD

81,30±2,54

78,76±2,61

73,63±7,64

0,113

Центральное пульсовое АД (мм рт.ст.), M±SD

39,29±2,91

34,48±2,97

36,25±6,96

0,074

Центральное среднее АД (мм рт.ст.), М±SD

97,81±2,85

93,24±3,11

88,43±8,55

0,033

ОХ (ммоль/л), M±SD

5,65±0,23

5,65±0,29

4,54±0,36

0,025

ХС ЛПНП (ммоль/л), M±SD

3,91±0,21

3,89±0,26

2,83±0,21

0,014

ХС ЛПВП (ммоль/л), M±SD

1,16±0,06

1,24±0,08

1,27±0,19

0,232

ТГ (ммоль/л), M±SD

5,65±0,23

5,65±0,29

4,54±0,36

0,025

ГН (ммоль/л), Мед. (Нкв-Вкв)

5,3 (5,0–5,9)

5,2 (4,8–5,7)

5,2 (4,85–6,2)

0,684

НвА1с (%), Meд. (Нкв-Вкв)

5,2 (5–5,6)

5,1 (4,7–5,4)

5,35 (5,05–5,6)

0,091

ИРИ (мкЕД/л), Мед. (Нкв-Вкв)

7,38 (5,6–12,2)

7,3 (5,55–9,0)

8,45 (5,45–10,4)

0,532

НОМА, Мед. (Нкв-Вкв)

1,81 (1,34–3,17)

1,74 (1,33–2,27)

1,92 (1,46–2,66)

0,429

Креатинин (мкмоль/л), М±SD

83,06±3,16

86,27±4,05

78,38±8,35

0,26

ИПФР-1 (нг/мл), Mед. (Нкв-Вкв)

131 (105–173)

151 (131–205)

116 (112–0)

0,042

Альдостерон (пг/мл), М±SD

97,24±15,58

81,57±18,32

103,33±77,89

0,420

АМ (мг/л), Мед. (Нкв-Вкв)

9,66 (5–16)

8 (5–12)

5 (3–0)

0,032

ДТЛ, M±SD

9,82±0,09

9,82±0,11

9,86±0,29

0,97

СПВ (м/с), M±SD

8,75±0,47

8,35±0,42

8,99±2,26

0,436

ТКИМ (мм), Мед. (Нкв-Вкв)

0,74±0,04

0,69±0,04

0,61±0,15

0,088

ЭЗВД (%), M±SD

10,19±0,69

11,61±1,02

10,14±1,84

0,06

 

Генотип CT был связан с меньшими значениями САД и центрального САД, а также с бóльшим показателем ИПФР-1.

У пациентов с генотипом DD отмечалось более высокое отношение объема талии/бедер, были ниже показатели ЭЗВД, ЛПВП, чаще встречалась эндотелиальная дисфункция.

Сравнение количественных параметров проводилось между генотипами GG, GT и ТТ. У пациентов с генотипом GG отмечались более высокие уровни центрального САД и центрального среднего АД, выше уровни ОХ и ОХ ЛПНП, более высокий показатель АМ и ИПФР-1 (см. табл. 4).

Сравнение неколичественных параметров проводилось между генотипами GG и GT. Генотип ТТ исключен из анализа в связи с малочисленной группой. Различия были выявлены для частоты эндотелиальной дисфункции: GG — 50%, GT — 27,12% (p=0,007); альбуминурии: GG — 10%, GT — 0% (p=0,032), индекса резистентности: GG — 35,29%, GT — 19,05% (p=0,03). Между АГ, ожирением, СД 2-го типа, повышением скорости пульсовой волны и ТКИМ, наличием атеросклеротических бляшек достоверных различий выявлено не было.

Для оценки связи параметров изменения артериальной стенки (атеросклеротические бляшки, ТКИМ >0,9 мм, ЭЗВД <10%, скорость пульсовой волны >10 м/с) с полиморфизмом генов с поправкой на факторы риска ССЗ были построены модели множественной логистической регрессии. Результаты приведены в табл. 5–8.

 

Таблица 5. Связь наличия атеросклеротических бляшек с факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний и изучаемыми генотипами

Параметры

β

SE

χ2 статистики

Вальда

p

ОШ

95% ДИ

Нижняя

Верхняя

Мужской пол

0,731

0,500

2,138

0,144

2,078

0,780

5,537

Возраст

0,132

0,025

28,656

0,000

1,141

1,087

1,198

АГ

1,571

0,516

9,282

0,002

4,811

1,751

13,216

СС-генотип AGT

-0,920

0,494

3,465

0,063

0,399

0,151

1,050

Примечание. ОШ — отношение шансов, ДИ — доверительный интервал, АГ — артериальная гипертензия.

 

Таблица 6. Связь толщины комплекса интима-медиа ≥0,9 мм с факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний и изучаемыми генотипами

Параметры

β

SE

χ2 статистики

Вальда

p

ОШ

95% ДИ

Нижняя

Верхняя

Мужской пол

1,564

0,681

5,273

0,022

4,776

1,257

18,145

Возраст

0,153

0,037

17,476

0,000

1,165

1,084

1,251

GG-генотип NOS3

-0,550

0,511

1,160

0,281

0,577

0,212

1,570

DD-генотип ACE

-0,443

0,388

1,304

0,254

0,642

0,300

1,373

Примечание. ОШ — отношение шансов, ДИ — доверительный интервал.

 

Таблица 7. Связь скорости пульсовой волны >10 м/с с факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний и изучаемыми генотипами

Параметры

β

SE

χ2 статистики

Вальда

p

ОШ

95% ДИ

Нижняя

Верхняя

Возраст

0,173

0,061

8,173

0,004

1,189

1,056

1,339

СС-генотип AGT

-0,822

1,064

0,597

0,440

0,440

0,055

3,537

Примечание. ОШ — отношение шансов, ДИ — доверительный интервал.

 

Таблица 8. Связь эндотелийзависимой вазодилатации <10% с факторами риска сердечно-сосудистых заболеваний и изучаемыми генотипами

Параметры

β

SE

χ2 статистики

Вальда

p

ОШ

95% ДИ

Нижняя

Верхняя

Возраст

0,057

0,019

9,114

0,003

1,058

1,020

1,098

АГ

1,550

0,441

12,329

0,000

4,710

1,983

11,185

GG-генотип NOS3

-0,590

0,357

2,726

0,099

0,554

0,275

1,117

DD-генотип ACE

-0,476

0,280

2,888

0,089

0,621

0,359

1,076

Примечание. ОШ — отношение шансов, ДИ — доверительный интервал, АГ — артериальная гипертензия.

 

По данным множественной логистической регрессии выявлена положительная связь наличия атеросклеротических бляшек с возрастом и наличием АГ (см. табл. 5).

Выявлена положительная связь утолщения комплекса интима-медиа с возрастом и мужским полом (см. табл. 6).

Выявлена положительная связь артериальной жесткости с возрастом (см. табл. 7).

Выявлена положительная связь эндотелиальной дисфункции с возрастом и наличием АГ (см. табл. 8).

ОБСУЖДЕНИЕ

Связь полиморфизма с.521C>T гена ангиотензиногена (AGT) c состоянием артериальной стенки и факторами риска ССЗ

Ген AGT расположен на длинном плече 1-й хромосомы в локусе 1q42.2. Однонуклеотидный полиморфизм с.521C>T (p.T174M) представляет собой замену цитозина на тимин в позиции 521, в результате чего происходит замещение треонина на метионин в 174-й позиции. В нашей работе приведена нуклеотидная запись генотипов данного полиморфизма (CC, CT, TT), которая аналогична аминокислотной записи (ТТ, ТМ, ММ), используемой в литературе [5, 8, 10]. По данным межгруппового сравнения полиморфизма с.521C>T, генотип СТ был связан с более низким САД и центральным САД, а также бóльшим показателем ИПФР-1. Ввиду малочисленности группы генотип ТТ не был включен в статистический анализ.

Ангиотензиноген — предшественник ангиотензина II. Ангиотензин II — ключевой компонент ренин-ангиотензин-альдостероновой системы, который играет существенную роль в эндотелиальной дисфункции и пролиферации гладкомышечных клеток, а также вазоконстрикции и фиброзе миокарда, участвует в патогенезе развития АГ [10]. Ангиотензин II способствует выработке NADPH-оксидазы и уменьшает биодоступность NO, запуская каскад образования активных форм кислорода и повреждения артериальной стенки, активирует матриксные металлопротеиназы [2]. Активация ренин-ангиотензин-альдостероновой системы играет одну из ключевых ролей в развитии окислительного стресса и хронического вялотекущего воспаления, что в свою очередь приводит к повышению артериальной жесткости и ускоряет процесс сосудистого старения [11].

ИПФР-1 — анаболический гормон, участвующий в росте, репарации и дифференциации клеток. Известно, что высокие нормальные уровни ИПФР-1 играют протективную роль в процессе сосудистого старения [12] и снижают системное воспаление и окислительный стресс [13]. У пациентов с метаболическим синдромом и циррозом печени уровни циркулирующего ИПРФ-1 снижаются с возрастом [14]. Результаты нашего исследования согласуются с данными литературы, где именно Т-аллель полиморфизма p.T174M ассоциирован с развитием ССЗ. Показано, что наличие T-аллеля повышает риск АГ в 1,6 раза [15]. По данным метаанализа W. Wang, Т-аллель связан с риском развития стеноза коронарных артерий [5]. В исследовании I. Isordia-Salas с соавт. была выявлена взаимосвязь полиморфизма p.Т174М с повышенным риском развития инсульта [8].

Связь полиморфизма Ins>Del гена ангиотензинпревращающего фермента (ACE) c состоянием артериальной стенки и факторами риска ССЗ

Ген ACE расположен на длинном плече 17-й хромосомы в локусе 17q23.3. Полиморфизм Ins>Del гена ACE представляет собой наличие или отсутствие Alu-повтора размером в 287 пар оснований в интроне 16. Ангиотензинпревращающий фермент участвует в реакции превращения ангиотензина I в ангиотензин II. Ангиотензин II снижает биодоступность NO и активирует воспалительные цитокины, что приводит к развитию эндотелиальной дисфункции [2]. Известно, что активные формы кислорода и окислительного стресса могут вызвать развитие ожирения путем влияния на пролиферацию, дифференцировку и рост адипоцитов, а также влияя на гипоталамические центры, участвующие в контроле потребления пищи [16]. Также активные формы кислорода приводят к окислению ЛПВП, что снижает их антиатерогенный эффект [17]. По данным результатов межгруппового сравнения генотипов II, ID и DD, у пациентов с генотипами ID и DD чаще выявлялась эндотелиальная дисфункция и отмечалось уменьшение ХС ЛПВП, повышение соотношения объема талии/бедер. Наши данные согласуются с результатами других авторов. По данным литературы, D-аллель ассоциирован с развитием АГ. Так, например, наличие D-аллеля полиморфизма Ins>Del ассоциировано с риском развития АГ в африканской популяции [18]. Генотип DD данного полиморфизма ассоциирован с резистентной АГ в популяции Морокко [7] и АГ в популяции шорцев в Западной Сибири [19]. D-аллель связан с худшим функциональным исходом при перенесенном ишемическом инсульте [20].

Связь полиморфизма c.894G>T гена NO- синтазы 3-го типа (NOS3) c состоянием артериальной стенки и факторами риска ССЗ

Ген NOS3 расположен на длинном локусе 7-й хромосомы в локусе 7q36.1. Полиморфизм c.894G>T (p.E298D) характеризуется заменой гуанина на тимин в 894-й позиции, что вызывает замену глутаминовой кислоты на аспарагиновую кислоту в 298-й позиции. Полиморфизм c.894G>T обеспечивает регуляцию NO [6]. NO является одной из важнейших молекул-вазодилататоров, снижающих окислительный стресс и участвующих в подавлении агрегации и адгезии тромбоцитов, а также пролиферации гладкомышечных клеток. Нарушение регуляции продукции NO тесно связано с патогенезом ССЗ, включая АГ и ишемическую болезнь сердца [21]. Известно, что нарушение биодоступности NO приводит к усугублению хронического вялотекущего воспаления и окислительного стресса и развитию эндотелиальной дисфункции [22], которая вызывает развитие хронической болезни почек и связанную с ней альбуминурию [23]. Окислительный стресс приводит к повышению уровня окисленных ЛПНП, что способствует усугублению развития атеросклероза. В межгрупповом сравнении полиморфизма c.894G>T у пациентов с генотипом GG отмечались более выраженные изменения артериальной стенки (более низкие значения ЭЗВД и чаще встречающаяся эндотелиальная дисфункция), липидного обмена (повышение ОХ и ОХ ЛПНП), а также чаще встречающиеся альбуминурия и инсулинорезистентность. Таким образом, G-аллель может быть связан со снижением биодоступности NO, что вызывает эндотелиальную дисфункцию. Данные настоящего исследования не в полной мере согласуются с данными литературы. К примеру, в популяции Пакистана было отмечено, что наличие TT-генотипа данного полиморфизма в 5,7 раза чаще приводит к повышению риска развития ишемической болезни сердца [24]. В исследовании I. Lambrinoudaki и соавт. была обнаружена положительная связь между Т-аллелем данного полиморфизма с повышением артериальной жесткости у молодых женщин [21].

По данным множественной логистической регрессии была выявлена положительная связь изменений артериальной стенки с такими известными факторами риска, как возраст, мужской пол и АГ, что согласуется с результатами других работ [2, 25].

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В нашей работе впервые комплексно изучалась связь полиморфных вариантов генов, связанных с развитием ССЗ, факторами риска и параметрами артериальной стенки. Нам удалось выявить связь полиморфных вариантов генов AСE и NOS3 с нарушением эндотелиальной функции. Можно сделать вывод, что носители генотипов ID и DD полиморфизма Ins>Del гена ACE и генотипа GG полиморфизма c.894G>T гена NOS3 могут находиться в группе риска развития изменений артериальной стенки и нуждаться в более агрессивной профилактике эндотелиальной дисфункции и коррекции факторов риска.

ИСТОЧНИК ФИНАНСИРОВАНИЯ

Работа выполнена в рамках государственного задания МГУ имени М.В. Ломоносова с использованием оборудования, закупленного по Программе развития МГУ.

КОНФЛИКТ ИНТЕРЕСОВ

Отсутствует.

УЧАСТИЕ АВТОРОВ

Л.М. Самоходская, И.Д. Стражеско, Я.А. Орлова — концепция и дизайн исследования; А.А. Акопян, А.Г. Сорокина — сбор материалов; С.Л. Леонов, Е.М. Гельфанд — обработка материалов; А.А. Акопян, К.И. Кириллова, И.Д. Стражеско — написание текстовой части работы.

×

Об авторах

Анна Александровна Акопян

Медицинский научно-образовательный центр ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова»; Российский геронтологический научно-клинический центр ФГБОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова»

Автор, ответственный за переписку.
Email: a.alexandrova18@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-2362-9798
SPIN-код: 4841-2901

стажер-исследователь отдела возрастассоциированных заболеваний; младший научный сотрудник лаборатории трансляционной медицины Российского геронтологического научно-клинического центра 

Россия, Москва

Карина Игоревна Кириллова

Медицинский научно-образовательный центр ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова»

Email: dkkirillova@gmail.com
ORCID iD: 0000-0002-0873-7387
SPIN-код: 4440-1859
ResearcherId: AAE-4599-2019

научный сотрудник отдела лабораторной диагностики

Россия, Москва

Ирина Дмитриевна Стражеско

Медицинский научно-образовательный центр ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова»; Российский геронтологический научно-клинический центр ФГБОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова»

Email: istrazhesko@gmail.com
SPIN-код: 9049-7884
ResearcherId: AAD-9390-2019

ведущий научный сотрудник отдела возрастассоциированных заболеваний; д.м.н., заместитель директора по трансляционной медицине

Россия, Москва

Лариса Михайловна Самоходская

Медицинский научно-образовательный центр ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова»

Email: SLM@fbm.msu.ru
SPIN-код: 9049-7884

к.м.н., доцент, заведующая отделом лабораторной диагностики Медицинского научно-образовательного центра

Россия, Москва

Сергей Леонидович Леонов

Алтайский государственный технический университет им. И.И. Ползунова

Email: sergey_and_nady@mail.ru

д.техн.н., профессор, профессор кафедры технологии машиностроения

Россия, Барнаул

Елена Михайловна Гельфанд

Алтайский Государственный Технический Университет им. И.И. Ползунова

Email: gelfand.el@gmail.com
ORCID iD: 0000-0001-5646-9324
SPIN-код: 6624-3640

к.техн.н., доцент, доцент кафедры высшей математики

Россия, Барнаул

Анна Григорьевна Сорокина

Медицинский Научно-Образовательный Центр МГУ им. М.В. Ломоносова

Email: drsorokinaag@gmail.com
ORCID iD: 0000-0003-2310-936X
SPIN-код: 2051-0379

научный сотрудник отдела возрастассоциированных заболеваний Медицинского научно-образовательного центра

Россия, Москва

Яна Артуровна Орлова

Медицинский научно-образовательный центр ФГБОУ ВПО «Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова»

Email: 5163002@bk.ru
ORCID iD: 0000-0002-8160-5612
SPIN-код: 3153-8373

д.м.н., профессор, руководитель отдела возрастассоциированных заболеваний Медицинского научно-образовательного центра

Россия, Москва

Список литературы

  1. World Health Organization. Cardiovascular diseases (heart attack, stroke) [Internet]. WHO; 2019 [accessed 2019 September 26]. Available from: https://www.who.int/westernpacific/health-topics/cardiovascular-diseases.
  2. Стражеско И.Д., Акашева Д.У., Дудинская Е.Н., Ткачева О.Н. Старение сосудов: основные признаки и механизмы // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. — 2012. — Т.11. — №4. — С. 93–100. [Strazhesko ID, Akasheva DU, Dudinskaya EN, Tkacheva ON. Vascular ageing: main symptoms and mechanisms. Cardiovascular therapy and prevention. 2012;11(4):93–100. (In Russ).]
  3. Vlachopoulos C, Aznaouridis K, Stefanadis C., Prediction of cardiovascular events and all-cause mortality with arterial stiffness: a systematic review and meta-analysis. J Am Coll Cardiol. 2010;55(13):1318–1327. doi: 10.1016/j.jacc.2009.10.061.
  4. Mozos I, Malainer C, Horbańczuk J, et al. Inflammatory markers for arterial stiffness in cardiovascular diseases. Front Immunol. 2017;8:1058. doi: 10.3389/fimmu.2017.01058.
  5. Wang WZ. Association between T174M polymorphism in the angiotensinogen gene and risk of coronary artery disease: a meta-analysis. J Geriatr Cardiol. 2013;10(1):59–65. doi: 10.3969/j.issn.1671-5411.2013.01.010.
  6. Luo JQ, Wen JG, Zhou HH, et al. Endothelial nitric oxide synthase gene G894T polymorphism and myocardial infarction: a meta-analysis of 34 studies involving 21,068 subjects. PLoS One. 2014;9(1):e87196. doi: 10.1371/journal.pone.0087196.
  7. Abouelfath R, Habbal R, Laaraj A, et al. ACE insertion/deletion polymorphism is positively associated with resistant hypertension in Morocco. Gene. 2018;658:178–183. doi: 10.1016/j.gene.2018.03.028.
  8. Isordia-Salas I, Santiago-Germán D, Cerda-Mancillas MC, et al. Gene polymorphisms of angiotensin-converting enzyme and angiotensinogen and risk of idiopathic ischemic stroke. Gene. 2019;688:163–170. doi: 10.1016/j.gene.2018.11.080.
  9. Cawthon RM. Telomere measurement by quantitative PCR. Nucleic Acids Res. 2002;30(10):e47. doi: 10.1093/nar/30.10.e47.
  10. Young CN, Davisson RL. Angiotensin-II, the brain, and hypertension: an update. Hypertension. 2015;66(5):920–926. doi: 10.1161/HYPERTENSIONAHA.115.03624.
  11. Neves MF, Cunha AR, Cunha MR, et al. The role of renin-angiotensin-aldosterone system and its new components in arterial stiffness and vascular aging. High Blood Press Cardiovasc Prev. 2018;25(2):137–145. doi: 10.1007/s40292-018-0252-5.
  12. Strazhesko ID, Tkacheva ON, Akasheva DU, et al. Growth hormone, insulin-like growth factor-1, insulin resistance, and leukocyte telomere length as determinants of arterial aging in subjects free of cardiovascular diseases. Front Genet. 2017;8:198. doi: 10.3389/fgene.2017.00198.
  13. Higashi Y, Sukhanov S, Anwar A, et al. Delafontaine, aging, atherosclerosis, and IGF-1. J Gerontol A Biol Sci Med Sci. 2012;67(6):626–639. doi: 10.1093/gerona/gls102.
  14. González-Guerra JL, Castilla-Cortazar I, Aguirre GA, et al. Partial IGF-1 deficiency is sufficient to reduce heart contractibility, angiotensin II sensibility, and alter gene expression of structural and functional cardiac proteins. PLoS One. 2017;12(8):e0181760. doi: 10.1371/journal.pone.0181760.
  15. Purkait P, Halder K, Thakur S, et al. Association of angiotensinogen gene SNPs and haplotypes with risk of hypertension in eastern Indian population. Clin Hypertens. 2017;23:12. doi: 10.1186/s40885-017-0069-x.
  16. Manna P, Jain SK. Obesity, oxidative stress, adipose tissue dysfunction, and the associated health risks: causes and therapeutic strategies. Metab Syndr Relat Disord. 2015;13(10):423–444. doi: 10.1089/met.2015.0095.
  17. Ito F, Sono Y, Ito T. Measurement and clinical significance of lipid peroxidation as a biomarker of oxidative stress: oxidative stress in diabetes, atherosclerosis, and chronic inflammation. Antioxidants (Basel). 2019;8(3). pii: E72. doi: 10.3390/antiox8030072.
  18. Yuan H, Wang X, Xia Q, et al. Angiotensin converting enzyme (I/D) gene polymorphism contributes to ischemic stroke risk in Caucasian individuals: a meta-analysis based on 22 case-control studies. Int J Neurosci. 2016;126(6):488–498. doi: 10.3109/00207454.2015.1036421.
  19. Mulerova T, Ogarkov M, Uchasova E, et al. A comparison of the genetic and clinical risk factors for arterial hypertension between indigenous and non-indigenous people of the Shoria Mountain Region. Clin Exp Hypertens. 2018;40(4):324–331. doi: 10.1080/10641963.2017.1377215.
  20. Malueka RG, Dwianingsih EK, Sutarni S, et al. The D allele of the angiotensin-converting enzyme (ACE) insertion/deletion (I/D) polymorphism is associated with worse functional outcome of ischaemic stroke. Int J Neurosci. 2018;128(8):697–704. doi: 10.1080/00207454.2017.1412962.
  21. Lambrinoudaki I, Chatzivasileiou P, Stergiotis S, et al. Subclinical atherosclerosis and vascular stiffness in premenopausal women: association with NOS3 and CYBA polymorphisms. Heart Vessels. 2018;33(12):1434–1444. doi: 10.1007/s00380-018-1198-1.
  22. Incalza MA, D’Oria R, Natalicchio A, et al. Oxidative stress and reactive oxygen species in endothelial dysfunction associated with cardiovascular and metabolic diseases. Vascul Pharmacol. 2018;100:1–19. doi: 10.1016/j.vph.2017.05.005.
  23. Huang MJ, Wei RB, Zhao J, et al. Albuminuria and endothelial dysfunction in patients with non-diabetic chronic kidney disease. Med Sci Monit. 2017;23:4447–4453. doi: 10.12659/msm.903660.
  24. Nawaz SK, Rani A, Yousaf M, et al. Genetic etiology of coronary artery disease considering NOS 3 gene variant rs1799983. Vascular. 2015;23(3):270–276. doi: 10.1177/1708538114544783.
  25. Cheng HM, Park S, Huang Q, et al.; Characteristics on the management of hypertension in Asia-Morning Hypertension Discussion Group (COME Asia MHDG). Vascular aging and hypertension: Implications for the clinical application of central blood pressure. Int J Cardiol. 2017;230:209–213. doi: 10.1016/j.ijcard.2016.12.170.

Дополнительные файлы

Доп. файлы
Действие
1. JATS XML
Скачать

© Акопян А.А., Кириллова К.И., Стражеско И.Д., Самоходская Л.М., Леонов С.Л., Гельфанд Е.М., Сорокина А.Г., Орлова Я.А., 2020

Creative Commons License
Эта статья доступна по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial-NoDerivatives 4.0 International License.
СМИ зарегистрировано Федеральной службой по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор).
Регистрационный номер и дата принятия решения о регистрации СМИ: серия ПИ № ФС 77 - 38032 от 11 ноября 2009 года.